ファージディスプレイライブラリからの猫カリシウイルスVP1-CDE領域に対する猫由来scFvの単離およびin vitro結合能と抗ウイルス活性の評価

3行まとめ

• 猫カリシウイルスVP1中和領域に対する猫由来scFv抗体を作製し抗原結合能と中和活性を評価した。
• 単離した5クローンのうち3A5が遺伝子群II株に対し強い中和活性を示し2H5も中和能を示した。
• これらscFv抗体は猫カリシウイルス感染症に対する新たな抗ウイルス治療薬や診断薬の候補となる。

この論文の要約

目的

猫カリシウイルス（FCV）は猫の上部呼吸器疾患や強毒全身性感染症の主要な病原体であるが、特異的な抗ウイルス薬は存在しない。本研究では、FCVの中和領域であるVP1-CDEを標的とした猫由来単鎖抗体（scFv）を単離し、その抗原結合特性およびin vitroでの抗ウイルス能を評価することを目的とした。

対象と方法

組換えVP1-CDEタンパク質で免疫した猫の末梢血単核球からscFvファージディスプレイライブラリを構築した。アフィニティパニングおよびファージELISAにより陽性クローンを選抜し、真核細胞でscFv-Fc融合タンパク質を発現させた。その後、ウェスタンブロット、生体膜干渉法、免疫蛍光抗体法、ウイルス中和試験を用いて特性を評価した。

主な結果

同定された5種の固有scFvクローン（3A5、3B8、3H5、2H5、2I5）は、いずれも組換えVP1-CDEタンパク質およびFCV感染F81細胞に特異的に結合した。ウイルス中和試験において、scFv-Fc-3A5は遺伝子群II FCV LZ2023分離株に対して最も強力な中和活性を示し（IC50= 1.862 µg/mL）、scFv-Fc-2H5は弱い中和活性を示した（IC50= 6.168 µg/mL）。残る3クローンには明らかな中和能は認められなかった。

臨床的意義

scFv-Fc-3A5およびscFv-Fc-2H5は、遺伝子群II FCVを標的とした診断試薬や抗ウイルス治療薬の開発において有望な候補分子となる可能性がある。

⚠️ この要約はAIが自動生成したものです。